藻类计数仪(藻类计数框怎么用)
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- 2022-06-12 22:33:51
有专用于藻类分类的计数器吗?
DX-CA8登讯8联浮游生物分类计数器非常好用。
做藻类的试验,怎么测定水中的藻类含量。最好是包括试验装置图片的
一般通过测量叶绿素a来表示藻类的含量:实验14叶绿素a和b含量的测定(分光光度法)。1.目的学习叶绿素a和b含量的测定方法,了解叶片中叶绿素a和b的含量。二。材料、用具、仪器及药品菠菜叶、721分光光度计、天平、研钵、剪刀、容量瓶(25ml)、漏斗、滤纸、乙醇(95%) III。原理叶绿素A和B在波长上的最大吸收峰在665nm和649nm处,叶绿素A和B的比吸收系数K在该波长处是已知的,因此我们可以根据Lamb列表计算叶绿素A和B的比吸收系数:D649=83.31CA18.60CB2.04和9.27是叶绿素a和b在665nm波长处的比吸收系数。16.75和45.6是叶绿素a和b在649nm波长处的比吸收系数。如果你解方程(1)(2),你会得到:CA=13.7D665—5.76D649四、四、四、五、六、六、六、六、六、六、六、七、六、六、七、八、九、九、九、九、九、八、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、九、方法步骤1。称取0.1g鲜叶,切成片,置于研钵中,加入10ml乙醇,研磨成匀浆,再加入5ml乙醇,过滤,最后用乙醇定容至25ml。2.取一个光学直径为1cm的比色杯,注入上述叶绿素乙醇溶液,在另一个同样规格的比色杯中加入乙醇。作为对照,在721分光光度计下,分别在665nm和649nm波长处测量颜料溶液的光密度。计算结果:叶绿素a含量(mg/g. FW)=叶绿素b含量(mg/g.FW)=总叶绿素含量(mg/g.FW)=见链接http://sky.scnu.e.cn/jpkc/zwslx/fenye/jakj/li/shi-yan/. 14.htm实验33(分光光度法)中也有叶绿素a和b含量的测定原理。如果混合溶液中两种组分的吸收峰明显不同,但吸收曲线相互重叠,在这种情况下,要分别测定两种组分,可以根据朗伯—比尔定律,用代数方法计算一种组分因另一种组分的存在而对吸光度的影响,最后分别得到两种组分的含量。9叶绿素a和b的吸收光谱曲线显示,叶绿素a的最大吸收峰在663nm,叶绿素b的最大吸收峰在645nm,吸收曲线相互重叠。根据朗伯—比尔定律,最大吸收峰不同的两种组分混合物的浓度C与吸光度A之间存在如下关系(见实验86):A1=Ca ka1cb kb1(1)A2=Ca ka2cb kb2(2)其中:Ca为组分A的浓度,g/L. Cb为组分b的浓度,g/l. A1为混合溶液在波长1处的吸光度A值(即组分A的最大吸收峰波长)。A2为混合溶液在波长2处的吸光度A值(即组分B的最大吸收峰波长)。Ka1为组分A的比吸收系数,即组分A浓度为1g/L时组分A在波长1处的吸光度A值,Kb2为组分B的比吸收系数,即其浓度为1g/L时组分B在波长2处的吸光度A值,Ka2为组分A(浓度为1g/L)在波长2处的吸光度A值。Kb1是组分B(浓度为1g/L)在波长1处的吸光度A值。叶绿素A和B的80%丙酮溶液可以从文献中找到。当浓度为1g/L时,比吸收系数K值如下:将表中的值代入上述公式(1)和(2)可以得到:A663=82.04Ca 9.27CBA 645=16.75Ca 45.60CB整理后得到如下公式:Ca=0.0127 A663—0.00269 a 645 CB=0.0229 a645—0.00468 a68 上述公式可改写如下:CA=12.7 a663—2.69 a645(3)CB=22.9 a645—4.68 a663(4)Ct=CA CB=8.02 a663 20.21 a645(5)(5)公式中,Ct为总叶绿素浓度,单位为mg/L,利用上述公式(3)、(4)、(5)计算叶绿素a、b的浓度和总叶绿素。
注:一般大学教学实验室用的分光光度计大多是721,属于低档类型。其单色光的半波宽度远大于中间型751,而叶绿素A和B的吸收峰之间的波长差仅为18 nm (663-645 nm),很难实现精确测定。此外,有时测量的准确性甚至更差,因为仪器本身的标称波长与实际波长不匹配。根据公式,叶绿素ab值通常小于1,这并不奇怪。除了向学生解释原因外,还可以在实验前对仪器的波长进行校正,使标称波长与实际波长一致。校准可以用纯叶绿素A和B进行,波长分别在650—670纳米和630—650纳米之间,每
隔1—2nm测定叶绿素a或b的吸光度A,以确定叶绿素a和b的吸收峰的波长。如果测得的峰值与文献上的峰值663nm和645nm不同,可按照仪器说明书步骤进行校正,或者更方便的方法可以打开仪器盖子,松动波长刻度盘紧固螺丝,调节刻度盘使波长至正确值,而后旋紧螺丝复原仪器。 为校正仪器波长所需的叶绿素a和b的用量是很少的,用纸层析法很快就能分离制得。取植物叶子约1g,用乙醚提取叶绿体色素,再用毛细管将色素溶液画在3mm厚滤纸上使成一直线,为使分离效果好,一般重复点样一次即可。然后于密闭容器中进行上行层析,溶剂为含0.5%丙醇的石油醚。层析结束,用剪刀小心地剪下蓝绿色的叶绿素a和黄绿色的叶绿素b,注意剪时尽量避开有可能遭污染的色区。最后分别浸于80%丙酮中,洗下叶绿素a和bhttp://bio.biox.cn/Biology/200701/20070106230337_25343.shtml只是说测叶绿素a是常规的表示藻类总量的方法,也有些在线直接测藻类的仪器,你可以搜一下。
怎样测叶绿素a 以及怎样进行蓝藻计数
欲知封闭水域会否出现藻类疯长,如蓝藻爆发等现象,应监测水域中的藻类数量以及水质,由于对藻类等浮游植物采用计数的方法测定误差较大,耗时费力,对检测人员的工作经验要求相对较高,一般可测定水中的叶绿素a含量代替藻类测定。当水中的叶绿素a含量突然增高,而且水中含有大量氮、磷等营养物质,加上阳光照射强烈,气候炎热等因素,该水域极有可能发生藻类疯长,可通知各有关部门尽早采取应对措施。 因为藻类是一类含叶绿素的、光合自养的、无胚的原植体植物,在浮游藻类里叶绿素a的含量大约占有机物比重的1~2%,是估算藻类生物量的较好指标。可预先测定藻类计数和叶绿素含量的相关关系,以叶绿素a的含量来推算藻类的数量,即通过测定水中的叶绿素来快速了解藻类的大致数量。 测定叶绿素a的仪器和方法有许多种,分光光度法测定叶绿素a是一简便易行的测定方法,水样经离心或过滤浓缩、研磨、丙酮提取后,定容,取上清液分别测量750nm、645nm、663nm、652nm等几个波长下的吸光度值,根据经验公式可分别计算出叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素的含量。 分光光度法测定叶绿素a,与测定其他物质稍有不同,如:测磷只需测定单一波长的吸光度值,再以该吸光度值代入由标准溶液测得的校准曲线计算含磷量。而叶绿素a无法使用校准曲线,需用几个波长下的吸光度值,根据经验公式来分别计算出各项指标的含量。因为叶绿体色素由叶绿素a、叶绿素b等物质组成,试液是多组分的混合溶液,在试液中分离这几类物质的难度较大,且无必要。叶绿素a在645nm和663nm 处均有吸收,在645nm处吸光系数较小,为16.75,在663nm 处较大,为82.04;叶绿素b 在645nm和663nm 处亦都有吸收,但在645nm处吸光系数较大,为45.60,在663nm 处较小,为9.27。由此可知:叶绿素a的吸收峰值出现在663nm 处,该吸收曲线延伸到645nm处,在此波长处的吸收系数不如在663 nm 处大,因此在计算公式中求算叶绿素a的含量时,需扣除叶绿素b在663nm和645nm 处的吸光度值,再进行计算。 标准分析方法要求,叶绿体色素提取液不可浑浊,在710nm或750nm波长下测量吸光度,其值应小于叶绿素a吸收峰的吸光度值的5%,否则应重新过滤。假定样品在663nm处的吸光度值为0.03,则在750nm处的吸光度值不得大于0.0015,对试液的清澈程度要求很高,测量710nm或750nm的目的是避免悬浮物质的干扰,一般测量水中的浑浊度所采用的波长为680nm,为避免在680nm处仍有叶绿素a产生的吸收值,故将测量浑浊度的波长选在710nm以上。在计算公式中,凡参与计算的各吸光度值都应减去710nm处的吸光度值,以扣除悬浮物质的干扰。 采用分光光度法测定叶绿素含量,对测量仪器分光光度计的波长精确度要求较高。如果波长与原吸收峰波长相差1nm,则叶绿素a的测定误差为2%,叶绿素b为19%,使用前必须对分光光度计的波长进行校正。校正方法除按仪器说明书外,还应以纯的叶绿素a和b来校正。
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